पीसीआर तकनीक का सिद्धांत क्या है? आणविक निदान में पीसीआर की भूमिका का उल्लेख करें।

उत्तर: पीसीआर या पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन तकनीक एक तेज और सस्ती तकनीक है जिसका उपयोग आर-डीएनए तकनीक में डीएनए के छोटे खंडों को ‘बढ़ाने’ या कॉपी करने के लिए किया जाता है (जिसके लिए इसे “आणविक फोटोकॉपी” कहा जाता है)।

पीसीआर डीएनए पोलीमरेज़ की क्षमता का उपयोग करने पर आधारित है ताकि प्रस्तावित टेम्पलेट स्ट्रैंड के पूरक डीएनए के नए स्ट्रैंड को संश्लेषित किया जा सके। पीसीआर का उपयोग करके डीएनए के एक खंड को बढ़ाने के लिए, नमूना डीएनए को पहले गर्मी लागू करके विकृत किया जाता है। नतीजतन, एक डबल फंसे हुए डीएनए दो एकल-फंसे हुए डीएनए में अलग हो जाते हैं। अगले चरण में, “टैक पोलीमरेज़” नामक एक एंजाइम डीएनए के दो नए किस्में संश्लेषित करता है, मूल किस्में को टेम्पलेट्स के रूप में उपयोग करता है। इस प्रक्रिया के परिणामस्वरूप मूल डीएनए का दोहराव होता है, जिसमें प्रत्येक नए अणु होते हैं डीएनए का एक पुराना और एक नया किनारा। फिर इनमें से प्रत्येक किस्में का उपयोग दो नई प्रतियां बनाने के लिए किया जा सकता है और इसी तरह। नए डीएनए को विकृत करने और संश्लेषित करने का चक्र 30 या 40 बार दोहराया जाता है, जिससे मूल डीएनए खंड की एक अरब से अधिक सटीक प्रतियां होती हैं। पीसीआर की पूरी साइकिल िंग प्रक्रिया स्वचालित है और इसे कुछ ही घंटों में पूरा किया जा सकता है। इस प्रकार, पीसीआर को तीन चरणों में पूरा किया जाता है- डबल फंसे हुए डीएनए को एकल स्ट्रैंड, एनीलिंग और बढ़ाव में बदलना।

पीसीआर तकनीक रोगों के आणविक निदान में उपलब्ध एक शक्तिशाली उपकरण है। विभिन्न रोगों के पैथोफिज़ियोलॉजी का प्रारंभिक निदान और समझ उनके प्रभावी उपचार के लिए बहुत महत्वपूर्ण है। पीसीआर रोगों के प्रारंभिक निदान के लिए उपलब्ध तकनीक है क्योंकि यह रोग के लक्षण दिखाई नहीं देने से पहले ही बहुत कम सांद्रता पर रोगजनकों (बैक्टीरिया या वायरस) का पता लगाने की सुविधा प्रदान करता है। यह पीसीआर द्वारा उनके न्यूक्लिक एसिड के प्रवर्धन से संभव है। इस प्रकार, पीसीआर का उपयोग अब नियमित रूप से संदिग्ध एड्स रोगियों में एचआईवी संक्रमण का पता लगाने के लिए किया जाता है। इस तकनीक का उपयोग कैंसर के संदिग्ध मामलों में जीन में उत्परिवर्तन का पता लगाने के लिए भी किया जा रहा है। इसके अलावा, पीसीआर निदान के लिए नियोजित एक शक्तिशाली और विश्वसनीय तकनीक है। कई अन्य आनुवंशिक विकार।